11-18
根據(jù)賓夕法尼亞大學(xué)佩雷??爾曼醫(yī)學(xué)院的一項(xiàng)新研究,隨著細(xì)胞老化,它們排出有害垃圾的能力下降。研究結(jié)果表明,老年神經(jīng)元中自噬的惡化-從未復(fù)制過(guò)的細(xì)胞和它們所居住的尸體一樣古老-可能是一系列神經(jīng)退行性疾病(如肌萎縮側(cè)索硬化癥,阿爾茨海默氏癥)的危險(xiǎn)因素,和帕金森氏癥。使用來(lái)自年輕和老年小鼠的神經(jīng)元的活細(xì)胞成像,生理學(xué)教授ErikaHolzbaur博士和作者,Holzbaur實(shí)驗(yàn)室的博士后研究員AndreaStavoe博士本周在eLife上發(fā)表了他們的研究。自噬的重要性在2016年...
10-31
酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)由于其易于操作,可以簡(jiǎn)單地回答樣本中有多少蛋白質(zhì)/多肽/抗體這一基本問(wèn)題,是實(shí)驗(yàn)室比較常用的一種檢測(cè)方法。而這種簡(jiǎn)單的分析方法的核心,就是標(biāo)準(zhǔn)曲線。沒(méi)有它,我們的實(shí)驗(yàn)就變成了一個(gè)二元的“是/不是”測(cè)試。有了它,我們可以深入研究生物反應(yīng)的細(xì)節(jié)。那么,是什么使得標(biāo)準(zhǔn)曲線如此強(qiáng)大呢?讓我們?cè)贓LISA的背景來(lái)討論這個(gè)問(wèn)題。簡(jiǎn)單地說(shuō),標(biāo)準(zhǔn)品就是一系列已知目標(biāo)蛋白數(shù)量的陽(yáng)性對(duì)照。例如,如果對(duì)人類IgG進(jìn)行ELISA檢測(cè),標(biāo)準(zhǔn)曲線將包含逐漸減少的已知量的人類I...
10-25
辛辛苦苦提完RNA,逆轉(zhuǎn)錄后一個(gè)個(gè)孔加完引物和模板,Z后進(jìn)行RT-PCR,你以為這樣就可以美滋滋地坐等結(jié)果了?等到一幅下面這樣的結(jié)果圖,不知道對(duì)于剛接觸RT-PCR的你來(lái)說(shuō)內(nèi)心是否是崩潰的?這是啥?怎么看?別急,讓我慢慢跟你介紹,看完后你就能準(zhǔn)確的分析出你的RT-PCR結(jié)果了。「這里以7500軟件為例進(jìn)行介紹」1.首先設(shè)置好內(nèi)參和對(duì)照組「在AnalysisSettings處」,一般我們?cè)谏蠙C(jī)前會(huì)對(duì)應(yīng)設(shè)置好的,如果設(shè)置好的話可以直接跳至第3點(diǎn)。如果沒(méi)有設(shè)置好的話是需要重新進(jìn)行設(shè)...
10-14
實(shí)驗(yàn)方法原理基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過(guò)程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成:①模板DNA的變性:模板DNA經(jīng)加熱至94℃左右一定時(shí)間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結(jié)合,為下輪反應(yīng)做準(zhǔn)備;②模板DNA與引物的退火(復(fù)性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合;③引物的延伸:DNA模板--引物結(jié)合物在Taq酶的...
9-19
蛋白抗體是什么?蛋白抗體升高是什么原因引起的?專家們給我們做出了介紹:甲狀腺球蛋白(TG)是由甲狀腺濾泡上皮分泌,主要儲(chǔ)存在甲狀腺濾泡腔,是甲狀腺激素合成的場(chǎng)地。在正常情況下有很少量的甲狀腺球蛋白釋放入血,甲狀腺球蛋白正常值蛋白抗體(TGA)的存在。因?yàn)榧谞钕俳Y(jié)合球蛋白可以影響血清甲狀腺球蛋白的測(cè)定。蛋白抗體是自身免疫性甲狀腺疾病病人血清中的一種常見自身抗體。它主要由IgG1、IgG2和IgG4組成,少部分為IgA和IgM。一般認(rèn)為TGAb對(duì)甲狀腺無(wú)損傷作用。TGAb與甲狀腺...
9-10
巴氏芽孢桿菌(Bacilluspasteurii)產(chǎn)脲酶,尿素酰胺水解酶,近來(lái)受到很多研究人員追捧,那如何培養(yǎng)這菌株成了很多大家關(guān)注的問(wèn)題,下面就一一詳細(xì)介紹巴氏芽孢桿菌如何培養(yǎng)說(shuō)明巴氏芽孢桿菌培養(yǎng)溫度:30℃培養(yǎng)時(shí)間:18-24小時(shí)培養(yǎng)基:.CASOAGAR+尿素(20克/升)酪蛋白胨15克大豆蛋白胨5克氯化鈉5克瓊脂20克蒸餾水1升PH7.3斜面菌種和凍干菌種應(yīng)在2-8℃保存。凍干活化,干粉要全部用完,不能保留,用0.1-0.2ml的培養(yǎng)液或者無(wú)菌水溶解,接種在2支斜面上...
9-6
在整個(gè)PCR體系中,引物占有十分重要的地位。PCR的特異性要求引物與靶DNA特異結(jié)合,不與其他非目的的DNA結(jié)合,PCR的靈敏性要求DNA聚合酶能與引物進(jìn)行有效的延伸,可見引物設(shè)計(jì)好壞與PCR結(jié)果密切相關(guān)。一、PCR引物設(shè)計(jì)原則1、引物長(zhǎng)度一般在15-30bp引物長(zhǎng)度一般為15-30bp,常用的為18-27bp,但不應(yīng)大于38bp,因?yàn)檫^(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致其延伸溫度大于74℃,不適于TaqDNA聚合酶進(jìn)行反應(yīng);2、引物GC含量一般為40%-60%引物GC含量一般為40%-60%,以45...
8-30
流式結(jié)果圖有4種類型,分別為:1.直方圖2.散點(diǎn)圖3.等高線圖4.密度圖下面一一為大家介紹1.直方圖(Histograms)a.橫坐標(biāo)代表熒光信號(hào)或散射光信號(hào)相對(duì)強(qiáng)度,可以是線性或?qū)?shù)坐標(biāo)。b.縱坐標(biāo)一般是相對(duì)細(xì)胞數(shù)。直方圖適用于分析處理周期(如下圖)直方圖分析數(shù)據(jù)注意事項(xiàng):①不能比較不同標(biāo)記之間的表達(dá)量。如一號(hào)樣本單標(biāo)記CD133、二號(hào)樣本單標(biāo)記CD44,那么CD133與CD44表達(dá)量不能用直方圖進(jìn)行比較。②直方圖的形狀(直方圖的高度及寬度)取決于儀器的類型、處理軟件和樣本...
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